Creado mediante la Ley No. 580 del 18 de octubre de 1973 con las funciones de recoger y exponer cuanto sirva para expresar la vida y costumbre de los habitantes de la isla Española durante el período colonial. Guarda una valiosa colección de objetos de la época colonial. Está compuesto de nueve salas en dos edificios comunicados entre sí. En ellos funcionaron el Palacio de los Gobernadores y Capitanes Generales, la Real Audiencia (primer tribunal del Nuevo Mundo) y la Contaduría General. El museo está situado en la calle Las Damas esquina Mercedes, de la Zona Colonial de Santo Domingo. Los edificios fueron construidos por orden del rey Fernando II en 1511.